كيف يؤثر نقاء الماء على نتائج التحليل اللوني السائل عالي الأداء؟

لقد قمت للتو بتشغيل طريقة التدرج التي عملت بشكل مثالي في الأسبوع الماضي. تبدو معايير المعايرة نظيفة، ولكن يظهر الرسم اللوني للعينة ذروة إضافية عند 23.8 دقيقة. يمكنك استبدال العمود، وإعداد المخزن المؤقت الجديد، والتحقق من الكاشف. الذروة لا تزال موجودة. ثم تقوم بتبادل الماء الذي يدخل في الطور المتحرك، وتختفي القطعة الأثرية. تلك هي حقيقة الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء: نقاء الماء يكمن تحت كل فاصل، وعندما يتغير تتغير معه الطريقة.

يؤثر نقاء الماء على جودة بيانات HPLC بأربع طرق عملية: استقرار خط الأساس، وشكل الذروة، وإمكانية تكرار نتائج الاحتفاظ، وعمر الأداة. قد تكون الملوثات المعنية عبارة عن جزيئات عضوية، أو أيونات مذابة، أو جزيئات، أو ميكروبات. حتى كمية صغيرة من نوع واحد من الشوائب يمكن أن تؤدي إلى عواقب لا تتناسب مع تركيزها.

التأثيرات الرئيسية لنقاء الماء على HPLC

في نظام HPLC، الماء هو كاشف، وليس خلفية سلبية. فهو يحمل المخزن المؤقت، ويذيب العينة، ويساهم في خلفية الكاشف. وبالتالي فإن الشوائب الموجودة في الماء تنتقل مباشرة إلى الإشارة التحليلية. يلخص الجدول أدناه الملوثات الأكثر شيوعًا وآثارها.

هذه التأثيرات ليست نظرية فقط. يمكن للأغشية الحيوية الميكروبية الموجودة في خزان المياه أن تطلق مستقلبات ممتصة للأشعة فوق البنفسجية، وبمجرد أن يتشكل هذا الغشاء، فإن استبدال الماء ببساطة قد لا يحل المشكلة حتى يتم تنظيف الخزان وتعقيمه.

ماذا يعني "HPLC-Grade" والمياه من النوع 1 في الواقع

تتطلب معظم الطرق التحليلية مياهًا تتوافق مع مواصفات النوع الأول. من الناحية العملية، هذا يعني أن المقاومة عند 25 درجة مئوية تبلغ حوالي 18.2 ميجا أوم سنتيمتر، والتوصيل يقترب من 0.055 ميكروسيمنز لكل سنتيمتر، وإجمالي الكربون العضوي منخفض بما يكفي بحيث لا يخلق الماء خلفية مرئية للأشعة فوق البنفسجية أو MS. المقاومة وحدها ليست كافية. تحتاج أيضًا إلى معرفة مستوى TOC، وعدد الجسيمات، وفي بعض التطبيقات، قيم السيليكات أو الصوديوم.

الرقم الهيدروجيني للمياه النقية ليس مواصفات مفيدة. لا يمتلك الماء فائق النقاء أي قدرة تخزين مؤقتة تقريبًا، كما أنه يمتص ثاني أكسيد الكربون من الهواء بسرعة، لذا فإن الرقم الهيدروجيني الذي يبلغ حوالي 5.6 يعكس ببساطة ثاني أكسيد الكربون المذاب. الرقم الهيدروجيني المهم هو الرقم الهيدروجيني للطور المتحرك المخزن الذي تقوم بإعداده.

تعتمد متطلبات جودة المياه أيضًا على الكاشف. يعد الكشف عن الأشعة فوق البنفسجية عند 210 نانومتر حساسًا بشكل خاص للتلوث العضوي نظرًا لامتصاص العديد من روابط الكربون والأكسجين والنيتروجين هناك. يحتاج LC-MS إلى ماء به شوائب غير متطايرة منخفضة جدًا لتجنب قمع الأيونات وتكوين التقريب. وتتأثر كاشفات التبخر بالمثل بالتلوث غير المتطاير لأنه يرفع إشارة الخلفية. وبالتالي فإن الماء من النوع 1 يعد نقطة انطلاق سليمة لكل تطبيق HPLC تقريبًا.

يمكن للمياه المعبأة في زجاجات HPLC أن تعمل، ولكن يجب تخزينها والتعامل معها بشكل صحيح. تحقق من شهادة التحليل، وسجل رقم الدفعة، ولا تفترض أبدًا أن الحاوية القديمة خالية من النمو البيولوجي.

الشطف المتدرج يجعل شوائب الماء مرئية

تكون شوائب الماء أكثر وضوحًا في طرق التدرج. في سباق إيزوقراطي، قد يؤدي الملوث الذي يمتص الأشعة فوق البنفسجية إلى رفع خط الأساس قليلاً. في التدرج، يبدأ جزء الماء مرتفعًا ويرتفع جزء المذيب العضوي بمرور الوقت. يمكن الاحتفاظ بالملوثات عند رأس العمود ومن ثم التخلص منها مع زيادة المحتوى العضوي. وينتج عن ذلك قمم شبحية وخط أساس منجرف يمكن أن يتداخل مع التكامل والقياس الكمي.

هذا هو السبب في أن التدرج الفارغ هو أحد أبسط عمليات التحقق من جودة المياه. قم بتشغيل التدرج الدقيق الخاص بك دون حقن عينة. إذا ظهرت القمم في الفراغ، فإن الطور المتحرك مشكوك فيه.

عادات يومية تحافظ على نقاء الماء

الماء النقي لا يبقى نقيا بالصدفة. تمنع العادات التالية المشاكل الأكثر شيوعًا في ممارسة HPLC.

• استخدم الماء من نظام تنقية مزود بخراطيش جديدة ومصباح يعمل بالأشعة فوق البنفسجية والتعقيم المنتظم.
• اجمع الماء في وعاء نظيف ومغطى. لا تترك الحاوية مفتوحة أثناء تشغيل النظام.
• لا تخزن الماء لعدة أيام. تحضير الطور المتنقل بالماء العذب في نفس اليوم كلما أمكن ذلك.
• تجنب إضافة المياه العذبة إلى خزان مملوء جزئيًا. استبدل محتويات الخزان بدلاً من تعبئتها.
• قم بتشغيل تدرج فارغ عند الطول الموجي المستخدم للتحليل وتسجيل النتيجة.
• قم بتوثيق المقاومة وTOC وتاريخ جمع المياه في سجلاتك التحليلية.

بالنسبة للمختبرات التي تستخدم المياه المعبأة، تنطبق نفس القواعد. تحقق من تاريخ انتهاء الصلاحية، وأغلق الحاوية مباشرة بعد الاستخدام، ولا تعيد الماء غير المستخدم من الدورق إلى الزجاجة.

الإضافات تحول مشكلة المياه إلى مشكلة طريقة

ونادرا ما تحتوي المراحل المتنقلة على الماء وحده. تتم إضافة الأملاح المنظمة والأحماض وكواشف الزوج الأيوني وبعض المعدلات المتخصصة بتركيزات منخفضة نسبيًا. إذا كان الماء يحتوي على شوائب ممتصة للأشعة فوق البنفسجية، فقد لا تغير هذه الشوائب سعة المخزن المؤقت، لكنها لا تزال تظهر في إشارة الكاشف.

تُستخدم السوائل الأيونية أحيانًا كمعدلات طور متنقلة لتحسين شكل الذروة أو الانتقائية. عند اختيار واحد، يجب تطبيق نفس معيار النقاء. على سبيل المثال، 1-إيثيل-3-ميثيليميدازوليوم رباعي فلوروبورات هو سائل أيوني شائع للدراسات الكروماتوغرافية. يجب أن يذوب في الماء الذي يفي بالفعل بمواصفات النوع 1؛ وإلا فإن المادة المضافة تصبح مصدرا آخر للتلوث. إذا كنت تريد فهم الخصائص المتعلقة بفصل هذه المركبات، فلدينا نظرة عامة على كيفية أداء السوائل الأيونية في عمليات الفصل يغطي المتغيرات العملية.

CAS:143314-16-3 -1 -مورد السوائل إيثيل -3-ميثيليميدازوليوم رباعي فلوروبورات Ldet Technology هي الصين المخصصة CAS: 143314-16-3 -1 -Ethyl-3-methylimidazolium Tetrafluoroborate Liquids الموردين و1 -Ethyl-3-methylim... عرض المنتج →

النقاء يبدأ بالمورد

في شركة Zhejiang Ldet، نقوم بتصنيع السوائل الأيونية والمواد الكيميائية المتخصصة. نحن نعلم من الإنتاج أن الشوائب النزرة في المادة الأولية يمكن أن تغير الأداء النهائي. ولهذا السبب نقوم بفحص محتوى الماء والهاليدات المتبقية وسلوك الأشعة فوق البنفسجية قبل إطلاقها. ينتمي نفس التخصص إلى مختبر HPLC: اختر المواد التي تأتي بمواصفات موثقة. على سبيل المثال، 1-بوتيل-3-ميثيلميدازوليوم رباعي فلوروبورات يتوفر مع بيانات النقاء التي تتيح لك تقييم ما إذا كان متوافقًا مع طريقة الكشف الخاصة بك.

CAS: 174501-65-6-1-بوتيل-3-ميثيليميدازوليوم رباعي فلوروبورات موردي السوائل تقنية Ldet هي CAS مخصصة في الصين: 174501-65-6-1-Butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate موردي السوائل و1-Butyl-3-methylimid... عرض المنتج →

ما يجب التحقق منه على شهادة التحليل

• محتوى الهاليد المتبقي، لأن الهاليدات يمكن أن تؤثر على عمليات فصل التبادل الأيوني والتآكل.
• المحتوى المائي، لأن الماء يغير التركيز الفعال للمادة المضافة.
• طيف الأشعة فوق البنفسجية أو قطع الأشعة فوق البنفسجية، حتى تتمكن من التنبؤ بامتصاص الخلفية.
• الاتساق بين الكثير، لأن الدفعة الجديدة لا ينبغي أن تغير طريقتك بصمت.

إذا كنت بحاجة إلى مساعدة في مطابقة مادة مع طريقة ما، فيمكنك ذلك مناقشة بيانات النقاء والمتطلبات المخصصة مع فريقنا الفني .

معالجة الماء كجزء من الطريقة

نقاء الماء في HPLC ليس إعدادًا لمرة واحدة. وهو متغير يومي يمكن أن يتغير مع الموسم وزجاجة التخزين وحالة نظام التنقية. استخدم الماء من النوع 1، وتأكد من TOC والمقاومة، وتعامل معه بشكل صحيح، واختر المواد المضافة التي يمكن تتبعها. في طريقة مبنية على نانوجرامات من المادة التحليلية، لا يكون الماء "مجرد ماء".